Titelaufnahme

Die vorliegende Arbeit beschreibt den Einfluss von lipid raft-assoziierten Proteinen auf die T Zell Aktivierung. Hauptaugenmerk liegt dabei auf der Lymphozyten-spezifischen Kinase Lck und Glykosylphosphatidylinositol (GPI)-verankerten Proteinen, insbesondere dem Urokinase-Plasminogen-Aktivator Rezeptor (uPAR). Lipid rafts teilen die Zellmembran in unterschiedliche Bereiche ein, und können so zelluläre Signalwege regulieren. GPI-verankerte Proteine und Lck befinden sich innerhalb von diesen lipid rafts. Quervernetzen von solchen GPI-verankerten Proteinen durch Antikörper führt zur Aktivierung von T Zellen. Daher untersuchten wir ob GPI-verankerte Proteine die T Zell Aktivierung per se beeinflussen können und ob verschiedene GPI Anker Einfluss auf die Funktion eines GPI-verankerten Proteins haben. Allerdings fanden wir keine Anzeichen dafür, dass vertauschte GPI Anker Einfluss auf GPI-verankerte Proteine wie uPAR haben. Jedoch konnten wir beobachteten, dass uPAR als einziges GPI-verankertes Protein die T Zell Rezeptor-vermittelte T Zell Aktivierung beeinflusst. uPAR über-exprimierende T Zellen weisen gesteigerte Reaktivität auf und werden in aktivierungs-induzierten Zelltod geschickt. Verantwortlich dafür ist die Fähigkeit von uPAR durch Bindung an Vitronektin Zelladhäsion zu vermitteln. Das Integrin CD11b kann uPAR-induzieren Zelltod verhindern und somit T Zell Homöostase regulieren. Des Weiteren fanden wir, dass im peripheren Blut besonders blastoide, aktivierte zentrale Gedächtnis T Zellen, uPAR exprimieren. Die meisten von diesen exprimieren neben uPAR auch CD11b und Oberflächenmoleküle wie CLA und CCR4, welche darauf hinweisen, dass sie dafür bestimmt sind, in die Haut zu wandern. Tatsächlich fanden wir uPAR+ T Zellen in humanen Hautproben. Zusammenfassend zeigen wir, dass uPAR als einziges GPI verankertes Protein die T Zellaktivierung beeinflusst, und, dass die Zelladhäsions-vermittelnde Funktion des Protein-Teils verantwortlich für diese Beobachtung ist. Dieser Mechanismus könnte zur Regulierung von Adhäsion, Migration und Homöostase von Gedächtniszellen beitragen.

The present work describes the influence of lipid raft associated proteins on T cell activation, with a main focus on glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored proteins, in particular the urokinase receptor (uPAR). Lipid rafts are described to regulate cell signaling, by compartmentalization of the cell membrane. GPI anchored proteins and the key T cell kinase Lck both reside within lipid rafts. Interestingly, it has been shown that crosslinking of GPI anchored proteins by antibodies leads to activation of T cells. Here we studied the influence of GPI anchored proteins on T cell activation in general and whether different GPI anchors affect the function of a certain GPI anchored protein. Yet, we did not observe any functional consequences of substituted GPI anchors on uPAR, which we used as a model GPI anchored protein. However, we observed that uPAR but not other GPI anchored proteins affect T cell receptor-mediated T cell activation. uPAR overexpressing T cells are excessively reactive in response to T cell receptor stimulation and ultimately undergo activation-induced cell death (AICD). Responsible for this observation is uPARs ability to mediate adhesion to vitronectin. The integrin CD11b is able to prevent uPAR-mediated AICD and thereby could be able to regulate T cell homeostasis. Further, we found that in human peripheral blood, especially blasting, recently activated central memory T cells express uPAR. Most of those also co-express CD11b. These cells also express skin-homing markers like CLA and CCR4. Conclusively, we were able to find such uPAR+ T cells in adult human skin samples. Summarizing, we identified that uPAR but not other GPI-APs influences T cell signaling, and that it is its protein portion that confers this effect via mediating cell adhesion to Vn. This mechanism might contribute to regulation of adhesion, migration and homeostasis of memory T cells.